1. 引言
海星又被称为星鱼,属于棘皮动物门(Echinodemata)海星纲(Asteroidea),按照显带目(Phanerozonia)、有棘目(Spinulosa)、钳棘目(Forcipulatida)、桩海星目(Paxillosida)、瓣海星目(Valvatida)等5个目来划分 [1]。面包海星(cushion star)在2003年5月的时候,通过潜水或拖网的方式从海南三亚区域获取 [2]。经过德国01Derburg大学Dr Hans Uwe Dhms鉴定为瘤海星科动物Culcita novaeguineae,标本存于第二军医大学药学院海洋药物研究中心 [3]。海星在全世界的分布很普遍,海星所具有的药理活性物质现已成为创新药物十分典型而又重要的来源途径。近年来,海星皂苷类化合物的研究在国际药学界重要领域已经引起很强烈的关注,而且逐渐成为重要的研究课题 [4]。由于海星(sea star, starfish)是海洋底栖类特别常见的肉食性无脊椎动物,所以喜欢捕食软体动物(Mollusca),诸如牡蛎(Ostrea)、文蛤(Meretrix)、鲍(Haliotis)、扇贝(Chalmys)、贻贝(Mytilus)等众多的贝类生物,故海星是贝类和贝类养殖业的敌害。事实上,海星具有很强的繁殖能力和再生能力,渔民在海洋作业捕捞底层鱼类时,通常在同时捕到一样数量的海星,海星大多却被捡出来并扔进大海中导致不能被利用 [5]。在沿海经济建设的发展中,海星有着十分重要的价值,它是一类新的海洋动物资源 [6],与此同时它还有着十分广阔的市场应用前景,有很大很强的开发利用潜力,倘若有效而合理地进行开发利用,不但能够将其危害性转化为优势性,把这种废物变为珍宝,而且还可以保护贝类资源,利用商业化的开发途径促使经济效益进一步或甚明显提高 [7]。近年来海星资源在中国已经获得有关科研单位和生产企业频频关注,同时开展了多项医药学、食品工业等领域的海星活性化学成分、生理、药理、新药研制、临床应用、营养成分、食品和功能性食品加工等诸多方面具有研究价值的调研 [8]。
在全世界有大约两千多种海星分布于海洋的广阔领域,从海间到海底均有广阔分布 [9]。其中阿拉斯加一带和加利福尼亚的东北部太平洋水域一带分布的种类是最丰富的。面包海星(cushion star),拉丁名为Culcita novaeguineae,海星纲瓣海星目瘤海星科棘皮动物门,是大型海星,形状像方形的大块面包,故面包海星又俗称馒头海星,不同区域的珊瑚礁区时常出现,成体的腕长大概能达到15公分以上。通常都有五只腕足,但腕足又短又粗,没有明显的区分,和体盘连在一起,就像超级大型的菠萝面包。由于腕很短,因此身体呈五角形的形状,个体的颜色主要为红色或者褐色,在个体体表的末端上会有很多明显的小突起,颜色偏黄色。面包海星基本都捕食珊瑚虫的活组织,因此一般分布在珊瑚区地带,但是现如今已经很少见。面包海星的幼体一般在较浅的水区域栖居,有时候在潮间带也会有分布,体表颜色为浅绿色,体型不大,腕足较为明显,成体的外形和幼体的外形区别是比较大的。当下对海星的开发利用还没有开拓市场。所以开拓思路,加大对海星的开发与利用,有着十分重要的现实意义。
面包海星,棘皮动物门重要的经济种类,通常分布在零到十米的珊瑚礁区域的范围,以珊瑚虫的活组织为食。幼体通常会在水较浅的区域带生存栖居,一般在潮间带活动,在西沙群岛和海南这些地方常常会出现 [10]。身体呈现五角星形,整个横卧在海底,靠体壁的肌肉蠕动相互配合向前运动。体壁的肌肉通常比较发达,皮下的石灰质骨骼分布不集中,有的粗大向外有突起所以体表粗糙,有的细小所以身体特别柔软(成为经济可食种类)。常见的骨片有桌形体、杆状体、扣形体、各种字母形体等。
2. 材料与方法
2.1. 实验材料
面包海星水下形态见图1与图2,本实验的面包海星来源于西沙渔民捕捞的海星,如图3所示。
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Figure 1. The frontal structure of cushion star
图1. 面包海星正面结构
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Figure 2. The back structure of cushion star
图2. 面包海星背面结构
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Figure 3. Cushion star processed in the laboratory
图3. 实验室处理后的面包海星
2.2. 实验方法
先是将剪取好的体壁置于100%的无水乙醇中固定,然后用洁净的钳子剪取面包海星大概0.5 cm3的背部体壁组织,再用蒸馏水进行冲洗干净,实验的过程中尽量要把体壁中的肉剔除干净。紧接着用灭菌滤纸吸干水分后,再用剪刀把体壁组织剪碎。最后将剪碎的样品放置于清净的5 mL小烧杯中。
滴加0.5~1 mL NaClO溶液于上步小烧杯中,让其进行消化,时间在60~120 s,在此期间不断用镊子晃动样品。
当出现白色的颗粒比较多时,挑出没有消化的体壁组织,然后用4 mL蒸馏水进行冲洗。当白色的颗粒基本沉淀后,用吸管吸取上层溶液,再滴加蒸馏水,这样重复漂洗,进行3次。最终在显微镜下观察骨片。
3. 实验结果
待溶液中悬浮物沉于烧杯底部,再利用胶头吸管将烧杯底部的白色颗粒沉淀吸取1~2滴,滴于载玻片上,用灭菌滤纸吸去多余的水分后,放置于显微镜下进行观察和拍照(40倍镜)。
扣状体大多数呈现椭圆形,有多对穿孔,有的两对,有的三对,很像扣子,左右较对称。扣状体在骨片中分布是最多的形体,普遍存在,形状规则,区分明显,图4。
杆状体也可称为棒状体,形似棒状,杆状体有的较长有的较短,有的枝干略有弯曲,上面有小的突起,末端有小的分叉(图5(a)和图5(b))。
如图6所示,像U型字母,上面也没有任何突起,比较光滑状,U型开口有的较大有的较小,但差异不是很大。
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Figure 5. (a) Appearance like a pole; (b) Appearance like a false pole
图5. (a) 杆状体;(b) 假杆状体
P形体有点像一个铁锤型,上面也没有较明显的突起状,但类型偏少,如图7所示。
像一个字母C,有明显的弧度,但没有明显的突起,也有可能是比较大的骨片碎掉之后的部分,这个类型也不多,因此不能定论,如图8所示。
桌形体样式较不一样,一些底盘是圆形状,较光滑,一些会有突起,形状和大小都不一致,穿孔的数目也不同。上图左侧则是桌形体上部观察到的,形如桌子的表面观,右侧则是从底部观察到的,是桌子的腿部,比较规则立体,图9(a)、图9(b)。
可以称为舟形体,形似小舟,没有明显的突起状,两端杆状,中间圆形,仅一个圆形的孔。如图10(a)、图10(b)。
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Figure 9. (a) Appearance like a table (upper); (b) Appearance like a table (bottom)
图9. (a) 桌形体(上部观);(b) 桌形体(底部观)
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Figure 10. (a) Appearance like a boat; (b) Appearance like a boat
图10. (a) 小舟形;(b) 小舟形
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Figure 11. (a) Appearance like a tadpole; (b) Appearance like a tadpole
图11. (a) 蝌蚪形;(b) 蝌蚪形
如蝌蚪状,头部圆形,尾部较短的一段,没有明显的突起状。如图11(a)、图11(b)。
形如挂钩,一端呈弯钩形,中间有一个明显的环,末端有明显的突起或者小叉,图12。像一个没有底盘的靠椅,图13。
可以称作8形体或者无穷符号,两端呈圆形,中间是交叉段,图14。图15也属于扣形体的一种,但与扣形体不同的是,双孔扣形呈圆形,且仅有一对规则的穿孔。
类似于煎好的鸡蛋或者鸡蛋仔,三个连续的穿孔正向排列着,边缘略有微微突起状,图16。很直观的看上去像一个“回”字。外圈加上小内圈,呈双环形,如图17。
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Figure 18. (a) Appearance like fried eggs; (b) Appearance like a Chinese characters
图18. (a) 花纹形;(b) 回形
花纹样体的形状很像一个规则的花形纹绣,因此也可称作绣花状花纹样体,多孔圆形,孔的大小不等,但差距不是很大,所以看上去很均匀,整体呈现圆形,看上去也比较好看,像一朵盛开的花,图18(a)、图18(b)。
图19(a)、图19(b)所示,像一把会开门的钥匙一样,两端都有穿孔,前端细,最前端有微微突起像钥匙的齿状,后端较大。
图20也属于扣形体的一种,但是,没有对称的穿孔,仅是扣形体的一侧的形状。图21像乐器中的唢呐,形状较规则,无明显突起。
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Figure 19. (a) Appearance like a key; (b) Appearance like a key
图19. (a) 钥匙形;(b) 钥匙形
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Figure 22. (a) Appearance like a button; (b) Appearance like a button
图22. (a) 双扣形;(b) 双扣形
图22(a)、图22(b)也属于扣形体的一种,区别于双孔扣形体,双扣形呈现椭圆形而双孔扣形呈圆形,同时,又与扣形体不同,双扣形仅有一对穿孔,穿孔为长椭圆形且较为对称。
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Figure 23. (a) Appearance like a Halberd; (b) Appearance like a Halberd
图23. (a) 长戟形;(b) 长戟形
图23(a)、图23(b)像将士手中握的一种兵器长戟,一端带刺很尖,中间杆部两边会有穿孔,两边穿孔并不会对称存在,另一端会有弯曲的突起。
图24整体近似呈现长方形,内部有大小两对纵向排列的穿孔,没有突起。图25呈现字母D形,表观光滑无明显突起状。
图26像字母F形,但也有可能是其他类型骨片碎掉的部分,端部有略微的断裂的痕迹。图27如同一个被压了一下的大写字母R状,周边都较为光滑,无明突起状。
图28像一个大写的L形字母,没有突起状。图29形如一个大写的Q字母形,有唯一一个穿孔,没有明显的突起。
图30像一顶光滑的圆形帽子,边缘无帽檐,无突起。图31类似一把小汤匙,仅一个穿孔,汤匙的手把很直,无突起。
4. 结论
本研究通过电子显微镜对采取的面包海星的背部骨片类型与形态进行了实验的观察分析以及描述,最后得出以下重要结论:
1) 观察到的骨片包括桌形体、舟形体、花纹样体、杆状体、扣状体、单扣或双扣形体、C字母形体、P字母形体等多种类型,形状不一,各有特点,样式丰富。
2) 骨片类型为扣状体、杆状体、花纹样体和几种字母类型体的类型比较普遍,观察也很清晰。
由此可见,面包海星的骨片呈多种类型,骨片样式也较为丰富,具有一定的基础研究参考价值。
5. 讨论
我国沿海的海星资源丰富,沿海有100多种。对于海星的研究主要始于上个世纪,主要提取微量元素、活性物质,开发它的药用和经济价值 [11],而对于海星资源的种类、分布、分类的基础研究近年来才有所查阅,刘伟等系统报道了中国砂海星科的分类检索、鉴别特征、地理分布及分类学存在的问题 [5]。肖宁对中国海域角海星科和棘海星科分类及地理分布特点进行了研究 [12]。以及近年学者对中国海星资源的种类、分布与综合利用 [13] 和分类学的研究 [14] 、海星质量标准的定性研究 [15],本文从面包海星结构入手,详尽描述了骨片结构,为今后相关结构研究以及后续的生物演化、生态学、生物多样性监测与评估等研究提供了重要的基础资料。