1. 引言
在其他行业及医学领域中使用Image-Pro Plus进行图像分析已经超过20年 [2] ,Image-Pro Plus甚至能够自动进行细胞核数量计算 [3] 。在目前国内眼科临床行业中应用得较少(中国知网数据库检索10年内Image-Pro Plus在眼科临床应用的相关文章少于5篇,主要应用在角膜缺损面积的测量 [4] 及人工晶体倾斜度计算方面 [5] ,目前国内眼科临床中对很多眼部病变(如泪河高度,角膜异物大小,翼状胬肉大小,前房积脓高度,上睑下垂等)范围尺寸的判断往往只能通过裂隙灯下调整裂隙灯光带长度进行观察测量甚至只用直尺测量,所得出的测量结果误差大(表1),并且难以测量出超细微的结构(如泪河高度等),同时对于病变的变化(如翼状胬肉的增长,前房积脓的增高或降低)往往也只能靠眼科医生凭经验及印象判断。
针对以上的问题,借助目前临床中常用的眼前段照相系统配合图像分析软件Image-Pro Plus便能对常见眼部疾患进行精准的测量及记录。
2. 资料和方法
1、使用软件及系统的介绍:Image-Pro Plus是Image-Pro Software系列中的其中一款商业软件,具有强大的2D和3D图像处理、增强和分析功能,具有丰富的测量和定制功能,并允许用户自行编写针对特定应用的宏程序。Image-Pro Plus能轻易从多种设备上获取图像,如CCD摄像机、数字化CCD、Cooled CCD、扫描仪等,全面支持多种文件格式与输入设备,支持24位彩色、8位、12位、16位精确灰度,32位浮点图像,支持连续采集系列动态图像模式并可以影音文件的格式储存和重播。许多研究人员使用Image-Pro Plus进行图像的获取、计数、测量及分类对象以及自动化工作。 [6] [7] 本文使用的Image-Pro Plus软件版本为6.0.0.260。本文使用的眼前段照相系统为TOPCON BG-4。
2、测量前准备:A:定标操作:我们使用Image-Pro Plus进行眼部测量前需要进行定标操作,眼前段照相系统每一个照相倍率均需做一次定标操作(相当告知比例尺的大小)。首先准备好直尺,同时调整好裂隙灯的拍摄倍率(如设定为10×)并垂直照射直尺,拍下前段相片。使用Image-Pro Plus打开该相片(图1),然后打开Spatial Calibration面板(图2) (Measure > Calibration > Spatial …),新建标尺(点击New),修改标尺
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Table 1. 19 slit lamps of different brand models in our hospital was randomly selected, the accuracy rate was only 26%.
表1. 随机抽查我院不同品牌型号19台裂隙灯刻度的准确度,准确率仅为26%
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Figure 1. Adjust the length of the green length and fill in the corresponding value
图1. 调整绿色工字尺长度,并填入相应的数值
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Figure 2. Fill in the name and unit of the ruler in the panel, click Image
图2. 在面板中填入标尺名称及单位,点击Image
名称(Name),设置标尺的单位(Unit),生成标尺(Units/pixel面板中点击Image),在刚才打开的标尺相片中会出现一工字标尺,通过鼠标调节工字标尺测量对应的相片直尺后在弹出的Scaling面板中填入实际测量的数值(本例为15)。最后点击OK我们完成了10×倍率的相片标尺设置,以后测量10×倍率下拍摄的眼前段相片时调用该标尺便可。其他倍率标尺的设置过程同前。B:测量所用相片:使用我院TOPCON BG-4眼前段照相系统数据库中,抽取常见的眼部疾病眼前段相片数张,本文抽取的相片包括泪河相片,角膜异物,胬肉,前房积脓,上睑下垂。C:测量操作:首先打开需要测量的图片,选择上一步骤中设置好的对应标尺(Measure > Calibration > Select Spatial …),点击OK (图3)。最后点击长度测量工具(图4)使用“工字尺”工具(图5)在图片中使用鼠标调整需要测量的范围,便能自动得出测量数值。
3. 结果
泪河高度测量结果(图6),通过本方法可以得出精确的泪河高度数值。本图中泪河高度约为0.35 mm,测量过程仅需要病人在正常状态下于裂隙灯最大倍率下拍摄眼前段相片,然后使用Image-Pro Plus进行分析便可得到精确到微米级的数值,从而得到精确可重复性强的结果。对于泪道系统疾病可以起到一个很好的辅助诊断依据,对于干眼症的诊断能够提供一个简单快速的初步诊断方法,从而为病人的进一步泪液分析提供依据,从而能避免过度检查。
角膜异物大小的测量结果(图7)通过测量可知本图角膜异物长度为1.03 mm。临床中浅层的角膜异物往往比较细微,肉眼难以判断其精确的大小,角膜异物剔除以后异物往往难以保存,通过眼前段照相及Image-Pro Plus的分析,便能起到一个很好的异物证据保存作用。
翼状胬肉大小的测量结果(图8),此图的胬肉组织侵入角膜组织的长度达3.53 mm对于翼状胬肉患者,需根据其胬肉侵入角膜的范围大小从而决定是否手术治疗,把握准确的手术时机对于病人视力的恢复起到重要的作用 [8] 。通过本方法,在临床中能够简易精确地对胬肉的大小及变化进行测量,从而精准地把握最佳的手术时机。进而能够对决定是否行进行胬肉手术起到一个依据及标准化治疗的测量方法。
前房积脓高度的测量结果(图9),本图前房积脓高度为1.56 mm对于一些争分夺秒的眼科急诊,如铜绿假单胞菌性角膜炎,前房积脓的变化是体现药物治疗是否有效的重要指标 [9] ,使用Image-Pro Plus分析前房积脓的图片能够及早发现前房积脓高度的变化,进而为临床治疗提供重要参考。
上睑下垂的测量结果(图10),本图例中睑裂高度为6.2 mm。目前眼科临床中使用的睑裂高度测量仍然使用20年以前的手持直尺测量方法 [10] ,该方法测量精度低,容易产生误差而且不能通过图片的形式进行保存记录。嘱病人正视,后使用眼前段照相系统进行照相,再由Image-Pro Plus进行测量,便能得到精确的睑裂高度并且能够通过图片的形式永久保存。
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Figure 3. Select the corresponding ruler
图3. 选择对应的标尺
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Figure 4. Select the length measurement tool (red arrow)
图4. 选择长度测量工具(红色箭头)
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Figure 5. Select the length measurement tool (red arrow)
图5. 选择长度测量工具(红色箭头)
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Figure 6. The results of the height measurement of the tears River
图6. 泪河高度测量结果
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Figure 7. Measurement of corneal foreign body
图7. 角膜异物测量结果
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Figure 9. Hypopyon measurement results
图9. 前房积脓测量结果
4. 讨论
在计算机技术高速发展的今天,眼科的很多检查往往仍停留在调整裂隙灯光带测量甚至使用直尺测量的局面。因为眼科检查需要观测的对象细微,甚至超过了肉眼能够判断的极限,如裂隙灯下泪河的测量,部分研究甚至只能使用直尺在裂隙灯下估量泪河高度 [11] ,目前眼科临床中使用眼表综合分析仪进行泪河高度测量,但也仍需要手动测量泪河上下极对应点之间的长度 [12] ,同时眼表综合分析仪并非所有医院特别是基层医院能够配备的,利用便捷的眼前段照相系统,甚至只需裂隙灯配合手机拍摄出眼前段相片,配合Image-Pro Plus对眼前段相片进行测量,便能精确得到病患的泪河高度,便于基层医院开展干眼的初步诊治。
对于临床中需要一段较长时期内动态观察的眼部疾患,如翼状胬肉,通过肉眼观察较难判断胬肉侵入角膜的范围是否有扩大,对于侵入范围不断扩大的胬肉需要尽早手术治疗,通过定期对胬肉进行眼前段照相并使用Image-Pro Plus进行胬肉大小的测量,便能尽早发现翼状胬肉病变是否有进展,进而为眼科医生判断是否进行手术治疗提供重要依据。同时根据翼状胬肉的大小决定手术时机对病患的视力恢复有重要的影响 [13] ,通过对翼状胬肉眼进行眼前段照相及Image-Pro Plus进行翼状胬肉大小的测量,从而判断手术的时机能够对翼状胬肉病患带来最佳的手术效果,同时也为翼状胬肉手术的标准化治疗提供依据。
对于需要短时间判断体征改变的眼部急症,如感染性角膜溃疡引致的前房积脓,在治疗早期药敏报告未出结果的情况下,感染性角膜溃疡往往采用经验性广谱抗菌治疗 [14] ,其用药是否有效的其中一个重要的体征便是前房积脓高度的变化 [15] ,应用Image-Pro Plus对感染性角膜炎所致的前房积脓眼前段相片进行测量,其测量的精度能够达到微米级别,因此能够及时发现前房积脓高度变化的细微改变,从而能够为临床中继续用药或者调整用药提高参考依据。
目前上睑下垂手术术前检查项目中,提上睑肌肌力的测量仍在使用直尺测量 [16] ,实际检查中应用直尺测量容易造成人为的误差,包括手持直尺时的不可控制的位移及读取数值时的精确度偏低,同时检查所得数据需手写记录,不能通过图像的形式记录。利用眼前段照相系统及Image-Pro Plus测量代替直尺测量,能够大大提高测量的精确度同时能够通过图片形式保存检查结果。具体测量过程如下:用拇指压住眉部,以阻断额肌的提上睑作用,嘱患者尽量向下注视,使用眼前段照相系统拍摄第一张眼睑图片,再嘱患者尽量向上看,使用眼前段照相系统拍摄第二张眼睑图片,通过Image-Pro Plus分析两张图片12点钟方向睑裂的高度,两张图片中睑裂的高度差即为提上睑肌肌力。因为检查过程中,患者头部由眼前段照相系统中裂隙灯头托支撑,位置能够保存固定,避免了使用直尺检查过程中不可控制的位移导致的测量误差,提高了测量的准确性及精确度,同时能够很好地将整个检查结果通过图片进行保存。
Image-Pro Plus目前已广泛地应用于各行业,但在眼科方面的应用相对较少,希望本文能够起到抛砖引玉的作用,推进Image-Pro Plus在眼科方面更为广泛的应用。
参考文献