1. 引言
九香虫是昆虫纲半翅目兜蝽科昆虫 [1] ,作为中药,有理气止痛、温中助阳的功能,在西南地区,还是一道民间美食的原料。黄粉虫属于鞘翅目拟步行虫科昆虫,原产北美,被誉为“蛋白质饲料宝库”。大麦虫是一种拟步甲科昆虫,其最大的老熟幼虫比一般的黄粉虫大3~4倍,研究认为其含有大量人体所必需的微量元素,蛋白质含量也很丰富。综合上述,三种昆虫在医用、食用及饲用等方面各有特色,对其营养成分进行比较分析可为三者的合理利用提供参考。我们未检索到同时对三种昆虫营养成分进行比较研究的文章。为此,本研究拟主要对比三种昆虫的粗蛋白及可溶性蛋白质含量,为更加有效地利用三种动物资源提供借鉴。
2. 材料与方法
2.1. 材料与试剂
九香虫购自济南宏济堂医药连锁有限公司、黄粉虫及大麦虫幼虫均购自贵阳市贵钢花鸟市场。
所用试剂为分析纯:石油醚,乙醇,85%磷酸,牛血清蛋白等。
2.2. 主要仪器
分光光度计、电子天平、离心机、索氏提取器等。
2.3. 实验方法
分别取九香虫、黄粉虫和大麦虫适量,烘干,而后将烘干后的成虫放入研钵充分碾磨,索氏体取法抽提脂肪后,所得残渣称量,并用于下一步检查。每种昆虫做3个重复。
提取粗脂肪后的残渣过100目筛,称取1.0 g放入小烧杯中,加4 ml的蒸馏水溶解,转移到离心管中,再用4 ml蒸馏水洗涤烧杯,洗涤液收集于同一离心管中,在室温
20 ℃
左右的条件下放置30 min以充分溶解,然后在室温下4000 r/min离心20 min,去除沉淀,上清液转入到10 ml容量瓶中,并以蒸馏水定容至刻度,得到待测样品提取液。
标准曲线的绘制:取6支干净的试管按表1操作取样,将各试管中的溶液充分混合,放置2 min后,用1 cm光径的比色杯在595 nm波长下比色,记录各个试管测定的OD 595 nm光密度值,并以标准蛋白含量(μg)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制出标准曲线(图1)。
样品中可溶性蛋白质含量的测定 [2] :另取2支试管,分别吸取样品蛋白质提取液1 ml,并做一组重复,
![](Images/Table_Tmp.jpg)
Table 1. Configuration of bovine serum albumin solution with different protein contents
表1. 不同蛋白质含量的牛血清蛋白液配置表
![](//html.hanspub.org/file/10-2180775x9_hanspub.png)
Figure 1. The abscissa is the mass of protein (μg), and it sits vertically as the absorbance value
图1. 横坐标为蛋白质的质量(μg),纵坐为吸光度值
两支试管各加入5 ml考马斯亮蓝G-250蛋白试剂,充分混合,放置2 min后以空白为对照,用1 cm光径比色杯在595 nm波长下比色测定光密度OD 595 nm,然后通过标准曲线查得待测样品提取液中蛋白质的含量X (μg)。
3. 结果与分析
九香虫、大麦虫、黄粉虫干虫去脂后残渣含量见表2。
干虫脱脂后所得残渣,九香虫为56.73%,大麦虫为60.27%,黄粉虫为75.99,其中黄粉虫的残渣获取量最高,因残渣中粗蛋白为主要成分,所以残渣含量大致反映粗蛋白的含量。
九香虫、黄粉虫和大麦虫的OD值带入图1所示的标准曲线公式得出蛋白含量,如表3所示。
可溶性蛋白含量,换算后,黄粉虫最高约222.19 mg/g,其次为大麦虫157.03 mg/g,九香虫含量最少约为112.83 mg/g。
4. 结论与讨论
食用或饲用蛋白质有很多种类,按溶解度分类,可分为可溶性蛋白质和不溶性蛋白质。可溶性蛋白质是总蛋白质的一部分,其含量是一个重要的生理生化指标,可溶性蛋白质还是生物体重要的活性成分,作为营养成分易被身体吸收。本研究中,我们考察了三种昆虫的可溶性蛋白质含量,实验结果一方面可反映活性蛋白质的含量,另外,也可从侧面可以反映总蛋白质的量。
![](Images/Table_Tmp.jpg)
Table 2. Residue content of Coridius chinensis, Tenebrio molitor and Zophobas atratus after degreasing (Soxhlet extraction)
表2. 九香虫、大麦虫、黄粉虫干虫去脂后残渣含量(索氏提取法)
![](Images/Table_Tmp.jpg)
Table 3. Content of soluble protein in residue
表3. 残渣中可溶性蛋白质含量
蛋白质的测定方法,主要有凯氏定氮法与考马斯亮蓝比色法,前者干扰因素较多,后者干扰因素较少 [3] ,本实验采用后者。
通过对比,黄粉虫残渣获取量最高,超过大麦虫、九香虫皆在1/4以上。所得可溶性蛋白含量也以黄粉虫最高:超过大麦虫1/3,超过九香虫接近1倍。两者结合考虑,黄粉虫无论蛋白质含量还是蛋白质品质都比较突出,所以,无愧于“蛋白质饲料宝库”的称号。
总之,九香虫作为传统中药,自有其价值;大麦虫有资料称产量高于黄粉虫,各种营养成分含量均衡丰富等,因研究相对较少,后续有不少工作需要进行。本实验中,黄粉虫可溶性蛋白含量在三者中具有明显优势,加上黄粉虫售价便宜,作为替代的蛋白质饲料来源很有优势。
本试验对粗蛋白及可溶性蛋白的含量做了探讨,关于不同种类蛋白质的含量、分子量、比例及活性检测拟在后续的实验中进行。
基金项目
贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2013]2251号);贵州省教育厅基地项目(JD2013135)。